Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

Успешность экстракорпорального оплодотворения, в том числе с использованием донорских гамет, зависит, безусловно, от многих факторов.

Однако, прежде всего, важнейшим является качество половых клеток, от которого зависит, возможно ли оплодотворение и насколько жизнеспособным и качественным будет образовавшийся эмбрион.

Каждая женщина мечтает забеременеть после первой же попытки ЭКО и специалисты-репродуктологи и эмбриологи делают все возможное, чтобы это стало возможным. Решаясь на такой шаг нужно знать не только что такое донорство яйцеклетки с физической стороны, а и ознакомиться с юридической стороной вопроса.

Анализ на яйцеклетки женщины.

Именно поэтому при донорских программах всегда обязательно проводится проверка донора яйцеклетки по различным направлениям – от оценки репродуктивной функции до оценки состояния психического и физического здоровья.

Обследования донора ооцитов перед участием в донорской программе необходимо для того, чтобы оценить хотя бы косвенно и предварительно способность женщины к пункции яйцеклеток, а также предположить о качестве полученных таким образом ооцитов. Перед самим оплодотворением проводится анализ непосредственно полученных яйцеклеток. Все эти нюансы в обизательно вписывают в договор с донором яйцеклетки.

Какой бы ни был назначен анализ, на количество яйцеклеток у женщины он никак не повлияет. Исследование гормонального профиля позволяет лишь предполагать о возможностях яичников женщины и косвенно судить о ее возможном ответе на гормональную стимуляцию.

Исследуются гормоны крови в различные дни цикла, необходимость и целесообразность чего объясняется пациентке. Помимо стандартных исследований (пролактин, фолликулостимулирующий гормон, лютеинизирующий гормон, эстрадиол, прогестерон) можно и нужно оценить овариальный резерв донора, анализ на количество яйцеклеток у женщины.

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

Зачем же нужна оценка гормонального статуса донора и как она проводится?

Например, уровень фолликулостимулирующего гормона определяется на 2-5 день менструального цикла. По его результату можно косвенно предположить о степени реакции яичников на стимуляцию.

Так, например, при относительно низких цифрах ФСГ можно ожидать хороший ответ на стимуляцию, а при повышенном уровне может быть реакция неполноценной, недостаточной для получения яйцеклеток путем пункции фолликулов.

Как берут ооциты для донорства более подробно раскажет врач.

Еще в перечень обязательных обследований входит исследование на ингибин В, также в первую фазу менструального цикла. Этот анализа также позволяет судить о вероятной реакции яичников донора на медикаментозную стимуляцию.

Когда нужно оценить вероятный запас яйцеклеток, анализ крови берется на так называемый антимюллеров гормон. По одному только его уровню никаких предположений строить нельзя, однако на основе комплексной оценки уровня гормонов крови уже можно сделать определенные выводы о возможности участия женщины в протоколе донации яйцеклеток.

Помимо анализов крови, овариальный резерв можно оценивать по ультразвуковому мониторингу яичников. По количеству определяемых антральных фолликулов можно судить о фертильности женщины и ее возможному ответу на гормональную стимуляцию овуляции. Кроме того, это помогает правильно подобрать дозировку препаратов при стимуляции, чтобы обеспечить максимально оптимальный ответ яичников и при этом не допустить таких грозных осложнений, как синдром гиперстимуляции яичников, который может быть смертельно опасен для донора.

  • При определении овариального резерва нужно помнить о существовании двух принципиально разных понятий:
  • 1 – тотальный овариальный резерв – суммарное количество всех фолликулов, которые содержит яичник женщины (оба), находящихся на различных стадиях роста, включая примордиальные фолликулы.
  • 2 – функциональный овариальный резерв – это то, что отражает способность яичников реагировать на протокол стимуляции суперовуляции медикаментозным путем.

Помимо обычных анализов, можно также провести пробы для оценивания функций репродуктивной системы. Эти пробы могут показывать «в эксперименте», как яичник донора может отреагировать на полноценную медикаментозную стимуляцию суперовуляции. Женщина-донор должна быть информирована о необходимости таких дополнительных исследований и дать на них согласие.

Среди таких проб выделяют пробу с кломифен цитратом.

Проводится изучение начальных значений гормонального профиля, в частности количества эстрадиола и фолликулостимулирующего гормона, затем в течение 5 дней назначается препарат в выбранной дозировке и повторно анализируется уровень гормонов крови.

Если реакция недостаточная, то и стимуляция, вероятнее всего, будет недостаточно эффективна. Если же результаты хорошие, то это повышает шансы на адекватную реакцию яичников на стимуляцию.

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

Более точной является проба с использованием агонистов гонадотропин-рилизинг гормона, что дает более точные прогностические результаты. Схема пробы аналогична предыдущей, дозировка подбирается специалистом.

Экстракорпоральное оплодотворение проходит по тем же этапам, как и при естественном зачатии, поэтому все манипуляции последовательны и логичны.

Этап эмбриологического анализа – это один из центральных и важнейших этапах в протоколе ВРТ, в том числе при использовании донорских яйцеклеток, потому как оценка качества полученных яйцеклеток донора, процесс их оплодотворения и культивирования «in vitro» до стадии, когда их можно переносить в полость матки будущей матери, во многом определяет эффективность попытки экстракорпорального оплодотворения.

Чтобы получить донорские яйцеклетки, проводится протокол стимуляции суперовуляции. Это необходимо для того, чтобы была возможность изъять не 1-3 яйцеклетки, как при естественной овуляции, а гораздо большее их количество – обычно не менее 10.

Стимуляция может проводиться по различным схемам, это зависит от исходного состояния репродуктивной системы донора и ее овариального резерва.

Первичный анализ на определение количества яйцеклеток, которые можно получить после стимуляции, проводится путем ультразвукового исследования с оценкой степени ответа яичников на гормональное воздействие.

Эмбриологический этап начинается с момента проведения пункции фолликулов донора. Жидкость, которая находится в фолликулах, содержит в себе ооциты. Эту жидкость собирают в специальную емкость, и врач-эмбриолог сразу же приступает к ее первичному внимательному анализу под стереомикроскопом. Проводится тщательный анализ на наличие яйцеклеток у женщины в полученной фолликулярной жидкости.

Нужно учитывать, что фолликулярная жидкость содержит в себе фибриноген, что иногда приводит к образованию конгломератов и затруднению поиска нужных яйцеклеток.

Прежде всего, жидкость из фолликулов проверяют на наличие в ней так называемых ооцит-кумулюсных комплексов, затем переливают в чашку Петри и снова исследуют под микроскопом.

Найденные яйцеклетки очень аккуратно отмывают от окружающей жидкости в специально подготовленной среде, и переносят в ту емкость, где будет происходить уже дальнейшее дозревание яйцеклетки и все необходимые с ней манипуляции.

  1. Учитывая очень малые размеры яйцеклеток и необходимость очень точных движений во время всех этапов, используются специальные микроинструменты – пастеровские микропипетки, капилляры (стеклянные или пластиковые), микроаспиратор и некоторые другие.
  2. Все емкости, чашки сразу подписывают, поэтому возможность путаницы и ошибок исключается.
  3. Когда яйцеклетки помещаются в подготовленную культуральную среду, эмбриолог проводит оценку их качества, количество и степень зрелости.

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

Существуют четкие критерии зрелой яйцеклетки: размер от 110 до 120 мкм, наличие вокруг ооцита оболочки – так называемой блестящей пленки, наличие нескольких клеток лучистого венца и клеток яйценосного бугорка.

Как именно проводится анализ качества яйцеклеток донора, полученных после стимуляции суперовуляции и пункции фолликулов? Подсчет ооцит-кумулюсных комплексов обязателен перед инкубацией.

Помимо необходимости знать точное количество потенциально готовых к оплодотворению яйцеклеток, нужно оценить их качество, прежде всего, степень зрелости.

Это может помочь подсчитать время, когда нужно провести оплодотворение, предположить шансы на эффективность, а также выявить некоторые возможные аномалии ооцитов.

Первично оценивают морфологические особенности полученных яйцеклеток.

В зрелой яйцеклетке, полученной путем пункции фолликулов, должно быть закончено первое деление мейоза, после которого происходит отделение первого полярного тельца. Обычно второе деление находится в стадии метафазы. Хромосомы образуют метафазную пластинку, становясь как бы в ряд, эта пластинка находится прямо над полярным тельцем.

Параллельно при этом в ооците происходит блок дальнейшего деления (мейоза), который снимается только проникновением сквозь оболочки яйцеклетки сперматозоида.

Помимо этого, проводится поиск и незрелых форм ооцитов, что имеет свои особенности.

Незрелые же ооциты находятся в той стадии мейотического деления, которая предшествует метафазе второго мейотического деления. В эту категорию попадают ооциты в стадии профазы первого мейотического деления, которые можно узнать по визуально определяемому зародышевому пузырьку или ядерной оболочке в цитоплазме.

Если лучистый венец и кумулюс присутствуют, то они, как правило, значительно уплотнены.

О переходе ооцита к зрелому состоянию свидетельствуют исчезновение первого полярного тельца, когда наступает вторая стадия мейотического деления, после чего наступает блокировка дальнейших процессов деления до момента проникновения сперматозоида.

О качестве яйцеклетки можно судить по ее форме, внешнему виду цитоплазмы – она должна быть гомогенной окраски. Если же видны гранулярность, вакуоли, то это оценивается как неблагоприятные признаки.

Если рассматривать морфологические критерии оценки качества ооцитов, то яйцеклетки можно разделить на несколько видов:

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

  • Дегенеративный ооцит, иначе называется атретическим
  • Значительно незрелый ооцит, когда определяется наличие зародышевого пузырька
  • Незрелый ооцит, когда зародышевый пузырек уже отсутствует, лучистый венец темный, кумулюс начинает отслаиваться
  • Недостаточно зрелый ооцит, когда лучистый венец освобождается, первое полярное тельце отсутствует
  • Зрелый ооцит, когда полностью развит кумулюс, просматривается первое полярное тельце. Такой ооцит готов к оплодотворению и имеет высокие шансы для успешного экстракорпорального оплодотворения.

Как донора, так и реципиента нужно предупредить, что все проводимые исследования ооцитов совершенно безопасны для будущего эмбриона, так же как и любой анализ крови на яйцеклетки не оказывает никакого негативного влияния на овариальный резерв и функционирование половой системы женщины. Только полноценное комплексное обследование донора может повысить шансы на эффективность экстракорпорального оплодотворения с ее яйцеклетками в донорских программах в дальнейшем.

Помимо этого, например, анализ на резерв яйцеклеток обезопасить донора с точки зрения возможности реализации ее собственных репродуктивных планов в дальнейшем, чтолбы убедится в этом и понять безопасность донорства яйцеклетки, отзывы можно изучить в интернете.

Поиск оптимальных методов диагностики репродуктивной функции донора и полученных яйцеклеток – это одно из перспективных направлений вспомогательных репродуктивных технологий, развитие которых помогает все больше повышать шансы на эффективность попыток экстракорпорального оплодотворения. На сегодняшний день возможности диагностики чрезвычайно высоки. Подобрать донора яйцеклетки и оценить работу половой системы донора, принять все мероприятия, чтобы не навредить ей при проведении всех необходимых для осуществления донации яйцеклеток манипуляций – от стимуляции суперовуляции до пункции фолликулов, поскольку это инвазивная процедура. Все исследования направлены на то, чтобы повысить качество оказываемой помощи и при этом минимизировать все возможные риски как для донора, так и для потенциальных будущих родителей, которые воспользуются ее услугами.

Читайте также:  Пластика бедер: что это такое, как делается

Пгд эмбриона при эко — что это значит?

ПГД эмбриона – это процедура, которая используется при проведении протокола экстракорпорального оплодотворения.

Манипуляция позволяет получить максимум информации об эмбрионе, что дает возможность отобрать самые качественные клетки для переноса.

Предимплантационная генетическая диагностика выполняется по показаниям и чаще назначается возрастным парам, но также может проводиться по желанию партнеров.

Предимплантационное генетическое обследование является способом обследования клеток эмбриона до переноса их в полость матки. Манипуляция не требует каких-либо усилий со стороны партнеров и осуществляется эмбриологами. Для будущих родителей, использующих методы ВРТ, разница в проведении протокола ЭКО с ПГД и без нее отсутствует.

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делаетсяПГД эмбриона проводится при нескольких неудачных ЭКО

Исследование генетических нарушений эмбриона – это манипуляция, с помощью которой специалисты могут предвидеть нарушения и прогнозировать результат переноса клеток.

Данная процедура дает возможность определить, унаследует ли ребенок хромосомные патологии от родителей.

Также диагностика позволяет выбрать эмбрион с определенным генетическим набором, что часто требуется при необходимости донации.

Предимплантационное обследование не представляет угрозы для будущей беременности и не способно навредить эмбриону. Сложно переоценить достоинства данной процедуры, поскольку она в разы снижает риск рождения детей с отклонениями.

Изучение генетического строения выполняется только при ЭКО. Во время естественного зачатия провести данную процедуру невозможно. Альтернативным способом обследования является пренатальная диагностика.

Однако при получении негативных показателей дородового обследования паре будет предложено сделать прерывание.

ПГД позволяет избежать таких проблем и при выявлении генетических нарушений у плода отказаться от его переноса.

Предимплантационное обследование может быть проведено по желанию пары в протоколе экстракорпорального оплодотворения за свой счет.

Показания для выполнения ПГД:

  • рождение в прошлом ребенка, который имеет генетические отклонения;
  • наличие у родителей генетических заболеваний, которые имеют половую принадлежность;
  • возраст партнеров – женщин от 35 лет, а мужчины от 40;
  • неудачные попытки проведения ЭКО в анамнезе;
  • привычное невынашивание беременности, самопроизвольное прерывание на одинаковом сроке;
  • серьезные патологии спермы у мужчины, морфологические изменения в большинстве клеток;
  • риск резус-конфликта между матерью и будущим ребенком.

Пары, которые не могут забеременеть естественным путем, в обязательном порядке получают консультацию генетика на этапе подготовки к использованию ВРТ. Специалист при необходимости назначает анализы с целью определения кариотипа и дает индивидуальные рекомендации относительно необходимости проведения ПГД эмбриона перед переносом.

В большинстве медицинских учреждений, специализирующихся на использовании вспомогательных репродуктивных технологий, предимплантационное обследование выполняется на 3 сутки.

К этому времени количество клеток эмбриона достигает 8, что позволяет без ущерба для дальнейшего развития провести анализ. Некоторые клиники предпочитают выполнять исследование на 5 день, когда количество клеток превышает 100.

Такой метод считается более точным, однако не дает достаточно времени для проведения расширенного анализа.

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делаетсяАнализ позволяет отобрать эмбрионы без генетических аномалий

В зависимости от вида протокола ЭКО специалисты индивидуально выбирают сроки проведения ПГД. Если предполагается криопротокол, то лучше выполнить биопсию на 5 сутки.

В этом случае перенос эмбрионов планируют не ранее следующего цикла, что позволяет получить детальную информацию о генетическом материале и выбрать самые качественные клетки.

Если протокол ЭКО не предполагает витрификации эмбрионов, то стоит сделать биопсию на 3 сутки развития зародыша.

У партнеров на этапе подготовке к экстракорпоральному оплодотворению часто возникают вопросы по поводу того, сколько делается ПГД и когда следуют перенос клеток.

При стандартном протоколе без криоконсервации исследование проводится в сжатые сроки. Перенос эмбриона должен быть выполнен не позднее 5 дней его развития.

Если биопсию взяли на 3 сутки, то у эмбриологов остается не больше 48 часов для генетического анализа.

Для партнеров, вступивших в протокол ЭКО, методика проведения процедуры с генетическим исследованием или без него не имеет существенных отличий.

На начальном этапе женщина принимает гормональные средства для стимуляции, после чего выполняется забор ооцитов с помощью пункции через влагалище. Мужчина в это время сдает сперму, необходимую для оплодотворения эмбрионов.

Для повышения качества клеток рекомендуется выполнить интрацитоплазматическую инъекцию, если у мужчины недостаточно хорошие показатели семенной жидкости.

После оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом полученный материал выращивается в специальных условиях. Для проведения биопсии берется один эмбрион и помещается в чашу. С помощью миниатюрных инструментов под контролем оптической системы выполняется повреждение его оболочки лазерным лучом. Затем пипеткой берется необходимое количество клеток – обычно 1 или 2.

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делаетсяРезультаты ПГД получают за несколько дней

На следующем этапе специалисты проводят генетическое исследование полученного материала. В это время эмбрион продолжает развиваться в искусственных условиях, напоминающих полость матки. Полученным клеткам присваиваются цифирные значения в соответствии с нумерацией эмбрионов. Поэтому любые ошибки в результатах проведенных манипуляций исключены.

По прошествии двух суток специалисты оценивают полученные результаты и сопоставляют их с развитием соответствующего эмбриона. На сегодняшний день используются 3 методики предимплантационного исследования эмбрионов. Способ проведения анализа выбирается индивидуально и зависит от исходных показаний.

В полость матки женщины переносятся только те эмбрионы, у которых в процессе обследования не было обнаружено хромосомных поломок.

Если процедура выполнялась с целью рождения ребенка определенного пола, то подсаживаются соответствующие клетки. Когда ПГД делают для предотвращения резус-конфликта, осуществляется перенос клеток с нужным показателем крови.

Важным моментом при выборе клеток является оценка их развития на момент получения результата исследования.

Преимущество ПГД заключается в следующем:

  • повышает вероятность успешного результата протокола;
  • снижает риск самопроизвольного прерывания беременности на ранних сроках;
  • позволяет избежать многоплодной беременности;
  • практически исключает рождение ребенка с генетическими патологиями.

Эмбриологи уверены, что лучше выполнять ПГД с последующей витрификацией клеток. Это позволяет сделать доскональный анализ. Последующий перенос выполняется в естественном цикле, что значительно снижает нагрузку на организм женщины и создает условия, максимально близкие к естественному оплодотворению.

Читайте далее: предимплантационная диагностика эмбрионов

Анализ яйцеклеток

С возрастом у женщины снижается количество и качество яйцеклеток и уже никогда не восстанавливается до прежнего уровня.

Факторы, такие как генетика, образ жизни, окружающая среда и медицинские проблемы, включая эндометриоз, операции на яичниках, химиотерапию и радиацию, могут влиять на количество и качество яйцеклеток женщины.

Хотя это снижение репродуктивной функции женщины происходит с возрастом, существует значительная разница в рождаемости среди женщин подобного возраста, что подчеркивает непредсказуемость и индивидуальность процесса репродуктивного старения.

Термин «овариальный резерв» относится к текущему запасу яйцеклеток у женщин и тесно связан с репродуктивным потенциалом. В общем, чем больше количество оставшихся яйцеклеток, тем лучше шанс для зачатия. И наоборот, низкий овариальный резерв значительно уменьшает шансы пациента на зачатие.

Основная цель проводить анализ на яйцеклетки женщины — выявить тех лиц, которые подвержены риску уменьшения запаса яйцеклеток в яичниках.

Хотя анализ на яйцеклетку не может предсказать конец репродуктивных лет, результаты вне диапазона, ожидаемого для возраста пациента, могут побудить человека проводить более агрессивные варианты лечения для достижения беременности.

Когда анализ яйцеклеток показывает уменьшение резерва яичников, при необходимости следует провести оценку фертильности. Разумно предположить, что окно возможности зачать может быть меньше, чем ожидалось, и попытка зачать раньше поощряется в этом случае.

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

Женщины с уменьшенным овариальным запасом обычно имеют регулярные менструации, но могут иметь ограниченный ответ на стимуляцию яичников препаратами для фертильности и сниженную вероятность достижения живого рождения в единый репродуктивный цикл.

Поскольку хронологический возраст женщины является самым важным фактором в прогнозировании репродуктивного потенциала пары, возраст часто руководит выбором метода лечения бесплодия. Однако только возраст не замещает все критерии оценки качества ооцитов. Следовательно, исследователи разработали более совершенные методы прогнозирования реакции пары на лечение бесплодия.

Некоторые из более сложных инструментов чтобы провести анализ качества яйцеклеток и для оценки потенциала рождаемости включают измерение ФСГ, ЛГ, эстрадиола и ингибина-В. Кроме того, поскольку пациенты не должны подвергаться всем исследованиям одновременно, решения относительно того, какой метод (ы) использовать, руководствуясь своим опытом выбирает практикующий врач.

Несмотря на то, что для измерения овариального запаса существуют несколько сложных тесто, большинство из них не имеет того, что мы считаем идеальной чувствительностью и специфичностью. Кроме того, нет единого метода интерпретировать эти тесты, так как клинический опыт этих тестов все еще развивается.

Тем не менее, большинству пациентов с бесплодием следует периодически проводить анализ крови на яйцеклетки, прежде чем проводить какое-либо усовершенствованное лечение бесплодия.

Клиницисты часто могут раскрыть ценную информацию о возможном резерве яичников из записей, описывающих реакцию пациента на более ранние попытки индукции овуляции. Знание того, как пациент отвечал ранее, показывает репродуктивную работоспособность в максимально широком диапазоне. Когда это доступно, такие записи представляют собой окончательный динамический тест состояния яичников.

Очевидно, что записи не были бы доступны для пациентов, у которых нет попыток индукции предшествующей овуляции. Однако наличие старых записей стимуляции не означает, что повторная оценка овариального резерва может быть исключена.

Предварительные записи стимулирования могут определять, как оценку овариального запаса, так и выбор соответствующего плана лечения в предстоящем цикле. Вполне вероятно, что лучшим выбором может оказаться использование донации ооцитов, как метода лечения бесплодия, доказавшего максимальную эффективность у женщин с низким овариальным резервом и с низким качеством ооцитов. В таком случае предстоит аналогичная проверка донора яйцеклетки.

Читайте также:  Кт кисти: подготовка, как делают исследование

Видео : Донорские яйцеклетки

Ооциты — что это такое: как происходит витрификация донора и процедура донорства, ооцит и донор ооцитов

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

Бесплодие считается наиболее страшным диагнозом для большинства женщин. патологию вызывает целый ряд причин, которые не удается излечить современными лекарственными средствами. Но благодаря некоторым разработкам супруги могут стать родителями, даже если у женщины до зачатия пропала репродуктивная функция.

Для этого медики используют донорские ооциты. Что это такое: так называют не созревшие яйцеклетки, которые можно пересадить от здоровой женщины той, в организме которой по определенным причинам она перестала вырабатываться. Но насколько безопасны подобные процедуры.

Особенности

Что такое ооциты. Это женские яйцеклетки, которые еще не прошли этап зрелости. Большинство из них женский организм получает еще во время рождения, так как именно в это время они закладываются в яичниках.

Пока девочки не созреют (происходит это в 12-15 лет), яйцеклетки находятся в организме в так называемом «спящем» состоянии.

Некоторая часть половых клеток погибает, так и не дождавшись созревания в яйцеклетке. Однако происходит это только с самыми слабыми и нежизнеспособными.

Важно! Поливитамины и витамины для беременных: какие лучше в 1 триместре

К наступлению детородного возраста у подростков остаются только наиболее сильные и полноценные клетки.

На качество ооцитов влияют разные факторы, начиная от состояния здоровья и заканчивая врожденными заболеваниями. У некоторых женщин яйцеклетка не способна самостоятельно созревать, в таком случае ооциты яйцеклеток можно получить от донора и «подсадить» к ним в организм .

Процесс развития половых клеток называется оогенезом, который протекает в 3 этапа:

  1. Размножение, при котором клетка проникает в яичник из специального мешка, после чего в нем происходит ее развитие. В этот момент она превращается в оогонию, то есть незрелую клетку, которая уже способна делиться.
  2. Второй этап подразделяется на два вида – цитоплазматический, при котором повышается масса ядра и цитоплазмы, и трофоплазматический, при котором происходит образование гликогена и жиров (такие компоненты накапливаются «с запасом», так как при оплодотворении они обязательно понадобятся эмбриону).
  3. Созревание, которое происходит при помощи гормонов, стимулирующих рост и полноценное развитие. Процесс начинается только у тех женщин, которые достигли возраста половой зрелости.

Важно! В случае отсутствия зачатия клетка разрушается в брюшной полости или в маточной трубе, после чего покидает организм во время менструального кровотечения.

Организм женщины устроен так, что каждый месяц в нем начинается развитие сразу нескольких яйцеклеток, однако до конечной стадии созревания из них доходит только одна. Иными словами, лишь одна яйцеклетка способна создать эмбрион, если в ее полость своевременно проникнет мужская гамета.

Особенности созревания

Что такое ооциты мы разобрались. Теперь поговорим о том, как идет процесс их созревания. Исследования показывают, что не все яйцеклетки могут полностью созреть – происходит это только с одной из тысячи.

  • Проводя научные подсчеты, можно увидеть, что каждая женщина с нормальной деятельностью репродуктивной системы может стать матерью 300-400 раз.
  • Именно столько полноценных клеток вырабатывается организмом от начала полового созревания и до наступления климактерического периода.
  • Донорство ооцитов может понадобиться, если половые органы женщины не способны самостоятельно вырабатывать их.
  • Происходит это в следующих случаях:
  • операционное удаление маточных придатков;
  • проведение химиотерапии;
  • наступление ранней естественной менопаузы;
  • истощение или врожденное нарушение деятельности яичников;
  • неправильное развитие данного орган

Внимание! Известна так называемая «критическая точка» роста яйцеклетки – если она быстрее других достигнет ее, больше ни одна не сможет полноценно созреть. Остальным придется ждать своего развития еще месяц в случае отсутствия зачатия.

После попадания в яичник недозревшая клетка начинает созревать. Как только это произойдет, она покинет половой орган и отправится в фаллопиевы трубы, где прикрепится к бахромке маточной трубы и будет ожидать сперматозоида.

Такой процесс носит название овуляция. Если зачатие происходит, 6-7 дней оплодотворенная клетка продвигается в матку, где закрепляется на специальную «пышную» поверхность, которая будет удерживать плодное яйцо.

Если зачатия не произошло, клетка на протяжении суток погибает.

Витрификация

Витрификация ооцитов (по-другому ее называют криоконсервация ооцитов) – это передача от здоровой женщины не созревшей яйцеклетки. Если организм бесплодной пациентки сможет сделать так, чтобы она созрела – это будет выгодно обеим женщинам. Ведь здоровая получит немалое вознаграждение, а бесплодная – уникальный шанс на вынашивание плода при своем страшном диагнозе.

Многим кажется, что криоконсервация ооцитов – полностью безопасная процедура, которая мало чем отличается от переливания крови. Однако это не так. Последствия от такого метода могут быть отрицательными.

Известно, что женский организм раз в месяц вырабатывает всего одну половую клетку, а для донорства этого мало. Ведь врачи обязательно смотрят на качество ооцитов. Кроме того, неправильно проведенная пересадка может погубить клетки.

Поэтому в таком случае донору требуется провести терапию при помощи гормонов, чтобы в несколько раз увеличить уровень передаваемого материала.

По закону донором может стать каждая здоровая женщина, достигшая совершеннолетия и половой зрелости.

Важно, чтобы у нее не было психических заболеваний, которые могут оказать негативное влияние на ооцит 1 порядка.

Важно заметить, что количество предыдущих беременностей в счет не идет. Однако врачи не советую соглашаться на процедуру тем пациенткам, у которых еще нет детей, так как донор ооцитов – серьезная задача, требующая немалой гормональной перестройки.

Познавательно! От чего помогает утрожестан: для чего его принимают

Последствия от нее для нерожавшей пациентки иногда бывают самыми непредсказуемыми. А ранее беременные дамы уже смогли оценить скачки гормонов, поэтому они смогут еще раз перенести такие изменения.

Донорство

Интересно ознакомиться с процедурой проведения пересадки женской клетки. Забор материала, необходимого для пересадки, выполняется в несколько этапов. Сначала донору требуется прийти в больницу, после предварительного обследования врачи проводят стимуляцию яичников. Важно заметить, что качество выполнения процедуры зависит от профессионализма докторов.

Затем следует провести пункцию фолликулов. Одна процедура подразумевает забор сразу нескольких яйцеклеток. Затем донору проводится 2 недельная гормональная терапия, начинается которая за 15 суток до предстоящей операции. После ее проведения пациентка находится 5-8 часов под присмотром докторов, так как иногда развиваются неприятные для ее здоровья последствия.

Внимание!

Ооциты и ЭКО

Идентификация и оценка зрелости ооцитов: что это такое, как делается

Ооциты – важный элемент женской репродуктивной системы. Это клетки-предшественницы яйцеклеток, они формируются во время внутриутробного периода в яичниках, и к моменту рождения их количество достигает нескольких миллионов. Но стоит отметить, что не все ооциты проходят перерождение и превращаются в яйцеклетку.

Ооциты: виды и особенности

Ооциты бывают нескольких видов: 1 и 2 порядка. Ооциты 1 порядка – это клетки, накопившие достаточное количество питательных веществ и закончившие митоз.

Они образуются в конце 3 месяца внутриутробного развития и сохраняются вплоть до наступления полового созревания.

Большинство ооцитов 1 порядка никогда не вступают в процесс мейоза и только 400-500 из них проходят все стадии развития и превращаются в яйцеклетки.

С момента наступления полового созревания примерно в середине менструального цикла под воздействием гормонов в яичнике начинается рост нескольких тысяч ооцитов 1 порядка (около 15000 -20000), заключенных в фолликулы. В это время запускается процесс 1 деления мейоза, который приводит к формированию ооцита 2 порядка.

Все стадии деления завершает только одна клетка из нескольких тысяч – образуется доминантный фолликул, который в определенный момент разрывается и выпускает ооцит 2 порядка в маточную трубу.

В течение суток клетка ожидает встречи со сперматозоидами, деление мейоза завершается только в случае успешного оплодотворения, если этого не происходит, то клетка погибает.

Ооциты 2 порядка, которые образуются из ооцитов 1 порядка в конце репродуктивного периода (после 40 лет), могут содержать дефекты, которые часто приводят к генетическим аномалиям и внутриутробным порокам развития.

ЭКО – метод лечения бесплодия, при котором оплодотворение яйцеклетки осуществляется вне организма женщины, а в полость матки переносятся уже полноценные эмбрионы.

Эта процедура проводится по показаниям и при отсутствии противопоказания.

Эффективность терапии зависит от многих факторов: возраста пациентов, качества ооцитов и их количества, качества эмбрионов, общего состояния организма женщины, ее индивидуальных особенностей и т.п.

В естественном цикле у женщины образуется только один ооцит 2 порядка, но ооциты при ЭКО образуются в большем количестве. Эффективность процедуры напрямую зависит от количества зрелых яйцеклеток, поэтому женщине назначается гормональная стимуляция яичников, приводящая к созреванию нескольких фолликулов и образованию до 15-20 ооцитов 2 порядка.

Как правило, после стимуляции овуляции у пациентки производят пункцию 7-20 ооцитов при ЭКО. Но бывают случаи, при которых у женщины, несмотря на стимуляцию, удается получить не больше 5-7 ооцитов, или они совсем не формируются.

По данным статистики, у 30% женщин пунктируют небольшое число ооцитов при ЭКО в результате слабой реакции на стимуляцию, и 15-20% протоколов прекращаются в результате отсутствия зрелых яйцеклеток или эмбрионов хорошего качества.

Эти показатели в большей степени характерны для женщин старшего возраста (после 40 лет), у которых снижен овариальный резерв, поэтому перед проведением ЭКО важно выполнить исследование овариального резерва.

Стоит отметить, что биологический возраст может не соответствовать паспорту и снижение резерва может быть выявлено у молодых пациентов, поэтому при обнаружении отклонений в состоянии здоровья важно вовремя обратиться к врачу.

Ооциты при ЭКО и оценка овариального резерва

Овариальный резерв – запас ооцитов в яичниках. Исследование показано женщинам старшего репродуктивного возраста, пациентам с бесплодием неясного генеза, лицам после химиотерапии, а также женщинам, направленным на терапию бесплодия при помощи вспомогательных репродуктивных методов.

Читайте также:  Лазерное омоложение кожи лица: что это такое, как делается

Для оценки овариального резерва проводят:

  • Определение уровня ФСГ и ЛГ и их соотношение;
  • Определяют антимюллеров гормон, эстрадиол, ингибин-В;
  • УЗИ органов малого таза;
  • Измерение объема яичников и подсчитывают количество яйцеклеток.

На качество и количество ооцитов негативно влияют инфекционные заболевания, частые стрессовые ситуации, аутоиммунные болезни.

Именно поэтому планировать беременность следует в молодом возрасте, когда функционирование репродуктивной системы осуществляется надлежащим образом.

Если время упущено, то остается вариант использования донорских ооцитов при ЭКО или обращения в криобанки (если предварительно заморозить свои полноценные яйцеклетки).

Ооциты при ЭКО и оценка их качества

В момент пункции яичников захватываются не только ооциты 2 порядка, но и другие элементы (кумулюсные клетки, частицы фолликулярного эпителия и т.п.).

Чтобы выявить ооциты, полученные компоненты промывают либо помещают в контейнер с антикоагулянтом и проверяют под микроскопом.

Хотя яйцеклетки можно разглядеть невооруженным глазом – они достигают 50-100 мкм в диаметре и выглядят как слизистые комочки.

Выявленные ооциты отмывают и перемещают в специальную среду для дальнейшего оплодотворения с помощью различных инструментов. Но перед этим специалист проводит оценку их качества.

Признаки зрелого ооцита при ЭКО: размер 110-120 мкм, блестящая оболочка вокруг яйцеклетки, есть клетки лучистого венца и яйценосного бугорка. У зрелого ооцита при ЭКО должно быть завершено 1 деление мейоза, в результате которого образуется полярное тельце.

При этом у яйцеклетки поставлен блок второго деления мейоза, который может снять только сперматозоид.

Низкое качество ооцитов при ЭКО – важная проблема женского бесплодия. В наше время нет эффективных методов улучшения ситуации, в сложных ситуациях рекомендуется использовать донорские материалы.

Для улучшения качества ооцитов в период планирования беременности женщине следует принимать поливитаминные комплексы, фолиевую кислоту, вит.

Е, омега-3, морепродукты, а также отказаться от вредных привычек и придерживаться правильного образа жизни.

В результате многочисленных исследований специалисты выявили, что окислители негативно отражаются на качестве и созревании ооцитов, поэтому антиоксиданты могут восстановить процесс созревания яйцеклеток и улучшить их качество.

Ооциты при ЭКО и варианты протоколов

ЭКО заключается в выполнении нескольких этапов:

  • Стимуляция яичников;
  • Пункция фолликулов;
  • Помещение сперматозоидов и яйцеклеток в специальную среду;
  • Оценка результатов на следующие сутки;
  • Культивация эмбрионов;
  • Перенос эмбрионов в полость матки.

Количество и качество ооцитов при ЭКО напрямую влияет на полученные результаты. Чтобы произошло оплодотворение, они должны быть зрелыми и правильно сформированными. Да и в течение 2-3 суток для развития эмбрион использует питательные вещества и энергию, накопленные в яйцеклетке.

Конечно, на итоги оказывает влияние и мужской фактор, культуральные среды, режимы хранения и содержания и т.п. К тому же не все эмбрионы проходят развитие, некоторые прекращают деление на 2-3 сутки, после переноса в полость матки или имплантации в эндометрий, что может быть связано с генетическими дефектами.

Поэтому так важно создать оптимальные условия для максимального результата.

В наше время пациенткам предлагается несколько вариантов протоколов ЭКО:

  • Стандартный протокол;
  • ЭКО в естественном цикле;
  • ЭКО с минимальной стимуляцией;
  • ЭКО с донорскими ооцитами;
  • ЭКО с замороженными ооцитами.

Вариант терапии подбирается в индивидуальном порядке, при этом их эффективность заметно отличается: ЭКО в естественном цикле и с минимальной стимуляцией успешны в 5-15% случаев, в стандартном протоколе – в 40-60%, с донорскими ооцитами – в 60-70%. Это связано с тем, что в протоколах используется разное количество и качество ооцитов.

При ЭКО в естественном цикле специалисты проводят пункцию 1 сформированного ооцита 2 порядка, поэтому шансы на успешное оплодотворение, развитие эмбриона и его имплантацию невелики. Хотя стоит отметить, что в этой ситуации условия максимально приближены к естественным процессам.

Ооциты при ЭКО с минимальной стимуляцией получают в небольшом количестве (чаще всего не больше 5). Это также отражается на шансах терапии. Протокол выполняется по показаниям.

ЭКО с донорскими ооцитами в большинстве случаев проводят женщинам после 35-40 лет из-за низкого качества яйцеклеток и эмбрионов, отсутствия собственных ооцитов, генетических заболеваний и других факторов.

Эффективность терапии высока, так как при ЭКО используются ооциты высокого качества, взятого у донора, к которому предъявляются определенные требования (возраст до 30, отсутствие физических и психических патологий, наличие хотя бы одного здорового ребенка).

Пройти полноценное медицинское обследование, определить овариальный резерв и подобрать подходящую методику терапии бесплодия вы можете в клинике «Центр ЭКО» Волгоград.

Оценка качества зигот/эмбрионов

1-й день развития.

1-й день оценивается наличие признаков оплодотворения и качество зигот. Наличие в яйцеклетке 2х пронуклеусов (PN) и 2 полярных тел (PB) указывает на нормальное развитие процесса оплодотворения.

Пронуклеусы ? это ядра половых клеток (сперматозоида и яйцеклетки) несущих по половине генетического материала от каждого родителя (22 аутосомные и 1 половую хромосомы). Ооцит содержит Х хромосому. Именно сперматозоид несущий половую хромосому X или Y определяет физиологический пол будущего ребенка.

Внешне данные сперматозоиды не различимы, однако существуют методы предопределения и диагностики пола будушего ребенка. Не оплодотворившиеся и с аномальным оплодотворением яйцеклетки (более 2 пронуклеусов) отсаживаются и наблюдаются.

Разработано несколько ?систем оценки зигот? или ?систем оценки пронуклеусов? (Ludwig M et al, 2000 Scott L et al, 2000 и т.д.). Наибольшее внимание уделяется: размеру и симметричности пронуклеусов, числу, количеству, равности и распределению нуклеолей, включениям цитоплазмы

2-й день развития.

На 2-е сутки после слияние генетического материала сперматозоида и яйциклетки происходит дробление ? деление клетки на 2. Клетки дробящегося эмбриона называются бластомерами.

На этой стадии можно оценить качество эмбриона по степени фрагментации (объему эмбриона, занимаемому безъядерными фрагментами цитоплазмы), чем она больше ? тем ниже считается потенциал этого эмбриона к имплантации и дальнейшему развитию. Помимо фрагментации оценивается форма и относительные размеры бластомеров (T.Hardarson, 2001).

Наиболее общепринятая классификация дробящихся эмбрионов по качеству ? A-B-C-D, где A ? самый лучший, D ? самый худший. Цифрами указывают количество бластомеров.

Оценка качества эмбрионов по степени фрагментации (A. Van Steiterghem et al., 1995)

  • — Тип А ? эмбрион отличного качества без ануклеарных (безъядерных) фрагментов (4А)
  • — Тип В ? эмбрион хорошего качества с содержанием ануклеарных фрагментов до 20% (4В)
  • — Тип С ? эмбрион удовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов от 21% до 50% (4С)
  • — Тип D ? эмбрион неудовлетворительного качества с содержанием ануклеарных фрагментов более 50% (4D)

Пример записи ? (6В) ? 6 клеточный эмбрион хорошего качества с содержанием ануклеарных фрагментов до 20%

3-й день развития

Еще через сутки эмбрион, как правило, уже состоит из 6-8 бластомеров. По литературным данным, ?генетическая машина? эмбриона запускается на 4-х клеточной стадии, в конце вторых ? начале третьих суток развития. До этого момента эмбрион развивался как бы ?по инерции?, исключительно на материнских ?запасах?, накопленных в яйцеклетке за время ее роста и развития в яичнике.

Если ?генетическая книга?, в которой закодирована программа нормального развития эмбриона, содержит ошибки: ?опечатки?-мутации, ?нет нужных страниц?-делеции или ?лишние страницы? ? дупликации, эмбрион останавливается в развитии. Это природный процесс отбора генетически нормальных эмбрионов.

Поэтому именно на стадии 4-8 бластомеров 4-19% эмбрионов останавливаются в развитии (так называемый ?блок развития?).

4-й день развития

На 4-е сутки развития эмбрион человека состоит уже, как правило, из 10-16 клеток, межклеточные контакты постепенно уплотняются и поверхность эмбриона сглаживается (процесс компактизации) ? начинается стадия морулы (от лат.

morulae ? тутовая ягода). Именно на этой стадии in vivo (в организме матери) эмбрион попадает из маточной трубы в полость матки.

К концу 4-х суток развития внутри морулы постепенно образуется полость ? начинается процесс кавитации.

Оценка морулы / компактизованного эмбриона (Tao J et al., HR, V 17, No 6, 2002)

— (A) Grade 4: эмбрион полностью компактизован. Клеточные мембраны видны нечетко, но ядра различимы.

— (B) Grade 3: компактизовано более 75% бластомеров. Эмбрион сохраняет сферичную форму и гладкую поверхность.

— (C) Grade 2: частичная компактизация (около 50% бластомеров), аномальная морфология эмбриона.

— (D) Grade 1: компактизация менее 50% бластомеров. Различимы фрагменты и некомпактизовавшиеся бластомеры.

Пример записи ? (М3) ? морула с компактизацией более 75% бластомеров.

5-6-й день развития.

С того момента, как полость внутри морулы достигает 50% ее объема, эмбрион называется бластоцистой. В норме формирование бластоцисты допускается с конца 4х по середину 6-х суток развития, чаще это происходит на 5-е сутки. Бластоциста состоит из двух популяций клеток ? трофобласт (однослойный эпителий, окружающий полость) и внутренняя клеточная масса (плотный комок клеток).

Трофобласт отвечает за имплантацию ? внедрение эмбриона в маточный эпителий (эндометрий). Клетки трофобласта дадут в дальнейшем начало всем внезародышевым оболочкам развивающегося плода, а из внутренней клеточной массы будут формироваться все ткани и органы будущего ребенка.

Чем больше полость бластоцисты и лучше развита внутренняя клеточная масса и трофобласт ? тем больше потенциал эмбриона к имплантации. Когда полость бластоцисты достигает значительного размера, истончившаяся за счет растяжения блестящая оболочка (ZP) разрывается и начинается процесс хэтчинга (выклева) эмбриона из блестящей оболочки.

Только после окончания этого процесса бластоциста способна имплантироваться (прикрепиться) в эндометрий матки. Имплантация происходит, как правило, на 6-7 день развития эмбриона.

Классификация эмбрионов на стадии бластоцисты. (D.Gardner, et al., 1999).

Степень зрелости бластоцисты:

— 1 степень ? ранняя бластоциста, полость бластоцисты меньше половины объема эмбриона.

— 2 степень ? полость бластоцисты больше половины объема эмбриона.

— 3 степень ? полная бластоциста. Полость полностью занимает объем эмбриона.

— 4 степень ? расширенная бластоциста. Полость бластоцисты становится больше и начинает истончаться ZP.

— 5 степень ? трофэктодерма ничинает проникать через ZP.

— 6 степень ? вылупившаяся бластоциста, покинувшая ZP.

Внутриклеточная масса (ВКМ):

— А ? плотно упакованная с большим количеством клеток.

— В ? более свободная группировка среднего количества клеток.

— С ? незначительное количество клеток

Трофэктодермальный слой:

А ? много клеток, формирующих трофэктодерму.

В ? немного клеток.

С ? незначительное количество больших клеток.

Пример записи ? (4АА) ? расширенная бластоциста, вкм ? плотно упакованная с большим количеством клеток, много клеток формирующих трофэктодерму.

Преимущества и недостатки переноса эмбрионов на 5 сутки развития>>

Исламгулов Денис Владимирович, врач-эмбриолог клиники ?Здоровье Женщины?

Оставьте комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *